Real Time PCR

Real Time PCR (qPCR),

moleküler biyolojide, DNA’nın gerçek zamanlı olarak çoğaltılması ve çoğaltılan DNA miktarının anlık olarak izlenmesi işlemini sağlayan bir tekniktir. Bu yöntem, gen ifadesi analizleri, genetik varyasyonlar ve mutasyon analizleri, patojen tespiti ve kantitatif analizler için oldukça değerlidir ve genetik araştırmalarda, tıbbi tanıda ve biyoteknoloji uygulamalarında yaygın olarak kullanılmaktadır.

Real Time PCR, çoğaltılan DNA’nın miktarını her çoğaltma döngüsünde izleyebilir, bu sayede kullanıcılar, belirli bir DNA dizisinin başlangıçtaki miktarını kesin olarak belirleyebilirler. Bu, end-point PCR metodundan farklıdır, çünkü end-point PCR’da DNA miktarı, çoğaltma işlemi tamamlandıktan sonra ölçülür.

Real Time PCR cihazları, floresan boyalar veya floresan işaretli prob molekülleri aracılığıyla DNA’nın gerçek zamanlı kantifikasyonunu sağlar. Bu floresan işaretçiler, belirli bir DNA dizisini hedefler ve DNA çoğaldıkça floresans sinyali artar. Bu sinyaller, çoğaltma sürecinde anlık olarak kaydedilir, böylece DNA’nın başlangıçtaki miktarı hakkında kesin bilgi elde edilir.

Bu teknik, moleküler biyologların genetik materyalin çok düşük konsantrasyonlarda bile tespit edilmesine olanak tanıyarak, hastalıkların erken tanısında, enfeksiyonların izlenmesinde ve gen düzenleme uygulamalarında çığır açmıştır. Aynı zamanda, Real Time PCR, gen ifadesi düzeylerinin çevresel faktörler, tedavi yöntemleri veya genetik modifikasyonlar sebebiyle nasıl değişebileceğini anlamak için de kritik bir araçtır.