α-Fukozidaz (Thermotoga maritima) · E-FUCTM

Bakış. α-Fukozidaz (Thermotoga maritima), glikoprotein ve oligosakkaritlerin indirgen olmayan uç kısımlarından α-L-fukoz kalıntılarını uzaklaştıran ısıya dayanıklı bir glikozidaz enzimidir (EC 3.2.1.51). Enzim, Thermotoga maritima kaynaklı olup rekombinant olarak yüksek saflıkta üretilir ve CAZy sınıflandırmasında GH29 ailesinde yer alır. Yaklaşık 54.351 dalton molekül ağırlığına sahiptir ve 3,2 molar amonyum sülfat içinde yaklaşık 5 Ünite/mL derişiminde kararlı bir süspansiyon olarak sunulur. Yüksek sıcaklık dayanımı sayesinde ileri glikobiyoloji ve karbonhidrat kimyası araştırmalarında güvenilir bir araç olarak kullanılır; termostabil yapısı, oda sıcaklığı enzimlerinin denatüre olduğu koşullarda dahi etkin çalışmasına olanak tanır.

Öne çıkanlar. Enzimin spesifik aktivitesi sıcaklıkla belirgin biçimde artar: 25 santigrat derecede yaklaşık 2,6, 37 santigrat derecede 4,2, 60 santigrat derecede 15 ve 95 santigrat derecede yaklaşık 195 Ünite/miligram düzeyindedir. Bir Ünite, p-nitrofenil-α-L-fukopiranozit substratından dakikada bir mikromol p-nitrofenol açığa çıkaran enzim miktarı olarak tanımlanır. Optimum pH değeri 5, optimum sıcaklık ise 95 santigrat derecedir. CAS numarası 9037-65-4'tür. Süspansiyon formu 2-8 santigrat derecede saklanır ve önerilen koşullarda bir yıldan uzun süre kararlılığını korur.

Uygulama. Enzim; glikan analizi, glikoprotein yapı çalışmaları ve karbonhidrat kimyası araştırmalarında kullanılır. Ayrıca 2'-fukozillaktoz (2'-FL) gibi fonksiyonel oligosakkaritlerin hazırlanmasında biyoteknolojik bir araç olarak değerlendirilir. Isıya dayanıklı yapısı, yüksek sıcaklıkta yürütülen enzimatik dizi analizlerinde tutarlı ve tekrarlanabilir sonuç verir ve substrat özgüllüğü çalışmalarında referans reaktifi olarak tercih edilir.