exo-1,4-β-D-Ksilosidaz (S. ruminantium) · E-BXSR

Bakış. exo-1,4-β-D-Ksilosidaz (Selenomonas ruminantium), (1,4)-β-D-ksilanların ve ksilo-oligosakkaritlerin indirgen olmayan uçlarından ardışık D-ksiloz birimlerini uzaklaştıran bir ekzo-glikozidaz enzimidir (EC 3.2.1.37). Enzim, Selenomonas ruminantium kaynaklı olup rekombinant olarak üretilir ve yaklaşık 61.900 dalton molekül ağırlığına sahiptir. E-BXSR-1KU ürünü, 3,2 molar amonyum sülfat içinde yaklaşık 500 Ünite/mL derişiminde kararlı bir süspansiyon olarak sunulur. Ksilan yapısının enzimatik parçalanmasında, hemiselüloz araştırmalarında ve oligosakkarit analizlerinde yüksek saflıkta referans reaktif olarak kullanılır. Rekombinant üretim, partiler arası tutarlı aktivite ve düşük yan-enzim içeriği sağlar.

Öne çıkanlar. Enzimin spesifik aktivitesi, p-nitrofenil-β-D-ksilopiranozit substratı üzerinde 40 santigrat derece ve pH 5,3 koşullarında yaklaşık 90 Ünite/miligram düzeyindedir. Bir Ünite, 50 milimolar sodyum süksinat tamponunda (pH 5,3, 40 santigrat derece) 5 milimolar p-nitrofenil-β-D-ksilopiranozitten dakikada bir mikromol p-nitrofenol açığa çıkaran enzim miktarı olarak tanımlanır. Optimum pH değeri 5, optimum sıcaklık ise 50 santigrat derece olarak belirlenmiştir. CAS numarası 9025-53-0'dır. Süspansiyon formu 2-8 santigrat derecede saklanır ve önerilen koşullarda bir yıldan uzun süre kararlılığını korur.

Uygulama. Enzim; karbonhidrat kimyası, ksilan ve hemiselüloz araştırmaları ile oligosakkarit yapı analizlerinde kullanılır. Ksilo-oligosakkaritlerin ksiloza kadar tam hidrolizi gereken uygulamalarda, indirgen olmayan uçtan seçici parçalama sağlayarak güvenilir sonuç verir. Araştırma ve yöntem geliştirme laboratuvarlarında biyokimyasal referans reaktifi olarak tercih edilir; enzimatik dizi analizinde ve substrat özgüllüğü çalışmalarında da yaygın biçimde kullanılır.

Ksilan ve ksilo-oligosakkarit yapılarının uçtan-kesim analizinde; karbohidrat ve biyoyakıt araştırmalarında ksiloz salımı üzerinden substrat karakterizasyonu sağlar. Her partiyle analiz-sertifikası (COA) verilir.